Verdünnung Substanz in DMSO berechnen

giwwelie · Anmeldungsdatum: 06.10.2023 Beiträge: 1

Meine Frage:
Hallo, ich stehe vor folgendem Problem:

Ich habe eine Stammlösung (50mM) einer Substanz, die in 100% DMSO gelöst ist.
Ich brauche nun aber Lösungen mit unterschiedlichen Konzentrationen der Substanz (zB. 0,2uM ; 0,3uM ; 0,5uM),mit einem Volumen von 100ul wobei DMSO in jeder dieser Verdünnungen aber konstant bei 0,1% gehalten werden soll.
(Zum Verdünnen wird beispielsweise einfach Wasser genommmen)

Meine Ideen:
Ich hatte erst die Idee, aus der ersten Stammlösungen, weitere verdünnte Stammlösungen herszustellen, deren DMSO-Gehalt bei 0,1% liegt und eine zusätzliche Lösung mit 0,1% DMSO und Wasser, mit der dann stetig die neue Stammlösung je nach Zielkonzentration verdünnt werden kann.
Allerdings ist dies nicht möglich, weil in der zweiten Stammlösung dann die SUbstanz unlöslich würde (weil DMSO zu niedrig) und ausfallen würde.

Ich stehe jetzt irgendwie total auf dem Schlauch und vielleicht kann mir jemand von Euch helfen? Ich muss ja letztendlich auch noch mit halbwegs pipettierbaren Mengen arbeiten (also so ab 1ul)

Vielen lieben Dank!

willy · Anmeldungsdatum: 22.07.2020 Beiträge: 272

Da stimmt irgendwas nicht oder ich verstehe es nicht.
Wenn die Substanz bei 0,1% DMSO "unlöslich würde (weil DMSO zu niedrig)", wie willst du dann Lösungen herstellen, bei denen "DMSO in jeder dieser Verdünnungen aber konstant bei 0,1% gehalten" wird?

imalipusram

Solche Verdünnungsreihen sind tricky, wenn die Substanzen nicht direkt in Wasser löslich sind und man unter Umständen gar nicht bemerkt, daß der Wirkstoff ausgefallen ist oder an der Gefäßwand adsorbiert ist. Hierzu mußt Du letztendlich etwas Analytik betreiben (HPLC etc), vor allem, wenn die Versuchsergebnisse nicht den Erwartungen entsprechen.

Versuche mal eine Zwischenverdünnung in 10% DMSO, mit der Du weitermachst. Manchmal hilft auch, umgekehrt zu arbeiten: Ein paar ul der Lösung in DMSO vorlegen und Wasser oder Puffer dazugeben,

Du kanst auch Alternativen zu DMSO probieren: N-Butylpyrrolidon (NBP, kein Gefahrgut), oder NMP, zur Not auch DMF (wenn gar nichts anderes funktioniert). Evtl. auch einfach die Konzentration an DMSO erhöhen, Zellkulturen und Enzyme stecken das erstaunlich gut weg.

Um was geht es genau?

Nobby · Moderator Anmeldungsdatum: 20.10.2014 Beiträge: 6443 Wohnort: Berlin

Ich würde die Stammlösung 1:1000 mit Wasser verdünnen. Dann ist die neue Lösung 0,1%ig an DMSO und 50 μM an Wirkstoff.
Mit der die Verdünnung mit 0,1%iger DMSO blank machen, um die anderen Konzentrationen zu erhalten.