Verfasst am: 08. Dez 2020 22:28 Titel: Verdünnung mit Konzentration aus NanoDrop für Restriktionsve
Meine Frage:
Im Nanodrop hab ich eine Konzentration von 5374ng / mikroliter erhalten.
Im Restriktionsansatz sollen 500 ng enthalten sein. Dieser muss aber mind. bzw. über 1 mikroliter betragen, damit ich diesen pipettieren kann.
Bei einer 1:10 Verdünnung komm ich auf 500 ng / 0,093 mikroliter ..
Wie muss ich vorgehen, dass in mindestens 1 mikoliter, die geforderte 500ng Konzentration enthalten ist?
Meine Ideen:
Laut der Formel: c1*V1=c2*V2 brauche ich dafür 10.75 Mikroliter...Dann müsste ich das Volumen von 10 auf 12 Mikroliter erhöhen damit das geht
AC-Gast Gast
Verfasst am: 09. Dez 2020 11:38 Titel: c
Müssen es denn genau 500 ng sein?
Du hast im Nanodrop eine bestimmte Konzentration ermittelt,welches Volumen hast du davon?
Wenn du davon 1 µl entnimmst und auf das 10fache verdünnst(also 9 µl
Ansatzlösung),hast du gut 10 µl mit einer Konzentration von 537 ng/µl .
Dann hättest du mit genau einem µl eine Stoffmenge von 537 ng.
Diese Stoffmenge kannst du mit Restriktionslösung weiter verdünnen,die stoffmenge bleibt ja gleich.
Du kannst hier mMn nicht genau auf 500 ng kommen,da du volumetrisch mit Pipetten nicht so "krumm" abmessen kannst.